Figura 1. Recta patrón: Absorbancia de 330 nm de diferentes diluciones de ofloxacino.
GARCÍA DELPECH S, GARCÍA GÓMEZ S, BARREIRO REGO A, CARRASCO LUNA J
SUMMARY
OFLOXACINE ABSORPTION AND LIBERATION BY DISPOSABLE CONTACT LENSES ONE DAY ACUVUE®
Purpose: To study the absorption and liberation of ofloxacine by One-Day Acuvue® disposable contact lens (CL).
Methods: Ofloxacine concentration is determinated by the UV absorbance of different ofloxacine solutions. 40 µl of ofloxacine solution are deposited on the convex surface of a CL. Each 5 min CL washes are done until ofloxacine is no longer detected in the wash saline solution (SS). The sum of the measurements is the absorbed quantity. If the surface-adhered ofloxacine is subtracted, then the ofloxacine absorbed by the CL can be obtained. In order to assess the ofloxacine released rate, the CL is loaded during 6 min, placed in a spectrophotometer cuvette, and then the UV absorbance is measured each min.
Results: 65% of an ofloxacine drop is absorbed in 6 min (31.3% is adhered to the surface and the 33.6% go into the CL). The-imbibed-by ofloxacine CL liberate 65 µg for 70 min and if the SS is changed each 5 min, the 100% is released in 35 min.
Conclusions: Disposable CL One-Day Acuvue are able to absorb and release ofloxacine in vitro.
Key words: Therapeutic Contact Lenses, One Day Acuvue, ofloxacine.
RESUMEN
Objetivo: Estudiar la absorción y liberación de ofloxacino por lentes de contacto (LC) desechables One Day Acuvue®.
Métodos: La concentración de ofloxacino se determina mediante la absorbancia UV de distintas diluciones de ofloxacino. Se depositan 40 µl de solución de ofloxacino en la cara cóncava de la LC. Cada 5 min se realizan lavados de la LC hasta que no se detecta ofloxacino en el suero fisiológico (SF) de lavado. La suma de las medidas es la cantidad absorbida. Si se le resta el ofloxacino adherido a la superficie, se obtiene el ofloxacino que absorbe la LC. Para valorar la tasa de liberación de ofloxacino, se carga la LC durante 6 min, se coloca en una cubeta de espectrofotómetro y se mide la absorbancia UV cada min.
Resultados: En 6 min se absorbe el 65% de una gota de ofloxacino (31,3% se adhiere a la superficie y 33,6% penetra en la LC). La LC embebida en ofloxacino durante 6 min libera 64 µg en 70 min y si se cambia el SF cada 5 min libera el 100% en 35 min.
Conclusiones: Las LC desechables One Day Acuvue son capaces de absorber y liberar ofloxacino in vitro.
Palabras clave: Lentes de contacto terapéuticas, One Day Acuvue, ofloxacino.
INTRODUCCIÓN
Desde la aparición de las lentes de contacto (LC) desechables de uso diario, debido a sus ventajas asociadas (reemplazo, coste,...), se ha estudiado su utilización como vehículo de diversos medicamentos.
El objetivo de este trabajo es valorar la absorción y liberación de ofloxacino con lentes desechables de etafilcon A.
MATERIAL Y MÉTODOS
Se utilizan LC desechables de reemplazo diario, One Day Acuvue® de Jonson & Jonson, grupo IV de la FDA, de 42% de polímero iónico (etafilcon A), 58% hidratación, 14,2 mm de diámetro, 9 mm de curva base y –0,50 dioptrías de potencia.
La medida de la absorbancia a 330 nm (UV) de una serie de diluciones del preparado comercial Exocin® (ofloxacino DCI 3 mg/ml) permite obtener la recta patrón de ofloxacino que se muestra en la figura 1, cuyo coeficiente de determinación (r2=0,9956) asegura buen comportamiento del método de medida.
Figura 1. Recta patrón: Absorbancia de 330 nm de diferentes diluciones de
ofloxacino.
En la cara posterior o cóncava de la LC se deposita una gota (40 ml) de colirio de ofloxacino permitiendo la imbibición durante diferentes periodos de tiempo. Al final de cada período se escurren las LC y se introducen en tubos de ensayo con 2 ml de suero fisiológico (SF), realizando un lavado rápido de la superficie de la LC. Luego se pasan a otros tubos con 2 ml de SF, donde permanecen 5 min, realizando después varios pases del mismo tiempo por otros tubos con 2 ml de SF, consiguiendo así un buen efecto lavado. A continuación, con el espectrofotómetro a 330 nm se mide la absorbancia en cada tubo, midiendo los sucesivos tubos hasta que la absorción es cero. Con la ecuación de ajuste de la recta patrón, hallada previamente, se calcula la cantidad de ofloxacino presente en cada tubo; y, la suma es la cantidad total absorbida y luego liberada por la LC.
La cantidad de producto que se adhiere a la superficie es la que se mide en el tubo del primer lavado rápido (tubo 1). La cantidad de producto que realmente penetra dentro de la LC se obtiene restándole la medida del tubo 1 al total de ofloxacino.
Para estudiar la liberación del producto se carga la LC poniendo, durante 6 minutos, una gota de ofloxacino en la concavidad de la LC. Después, tras escurrirla, se pasa a una cubeta espectrofotométrica con 2 ml de SF, que se introduce en el instrumento de forma que el paso de luz UV tenga lugar por el sobrenadante y no por la LC, midiendo así cómo aumenta la absorción con el tiempo. Por último, con la ecuación de la recta patrón se procede a la conversión de las unidades de absorción en mg de ofloxacino.
Cada experimento se ha realizado por triplicado. La temperatura ambiente del laboratorio se situaba en torno a los 22ºC.
RESULTADOS
En las determinaciones preliminares de peso y volumen pudo establecerse que una gota de colirio de ofloxacino corresponde a un volumen de 40 ml con un contenido de 120 mg de producto (3 mg/ml).
Los resultados obtenidos de la absorción de ofloxacino se pueden ver en la figura 2, donde se aprecia que a los 6 min. de imbibición se absorben 78 mg, que son un 65% del total de los 120 mg de la gota. La misma figura pone de manifiesto que aproximadamente la mitad de esta cantidad queda adherida a la superficie de la LC y la otra mitad penetra dentro de la LC.
Figura 2. Absorción de ofloxacino por la LC en función del tiempo de
imbibición.
Para estudiar la liberación del ofloxacino se mide la absorción espectrofotométrica cada 5 min obteniéndose la figura 3. A los 70 min la curva deja de ascender y presenta una inflexión, en cuyo momento ha liberado 64 mg de ofloxacino. En las experiencias de absorción, las LC cargadas con ofloxacino, con distintos tiempos de imbibición, se cambiaban cada 5 min a nuevos tubos con SF hasta que ya no liberaban el producto. La LC durante 6 min. liberaba producto hasta el tubo número 7, es decir, durante 35 min. si se cambia el SF cada 5 min.
Figura 3. Liberación de ofloxacino, en función del tiempo, desde la LC al
SF circundante.
DISCUSIÓN
El ofloxacino es un antibiótico potente, de amplio espectro, comercializado en colirio, que ha demostrado una eficacia comparable al tratamiento clásico de colirios fortificados de cefazolina y tobramicina en el tratamiento de las queratitis bacterianas (1,2). La fácil preparación y los escasos efectos tóxicos del ofloxacino hacen que se prefiera este colirio mejor que los fortificados porque no interfiere en la cicatrización, ni en la epitelización, de las heridas de la córnea (3,4), ni afecta al endotelio corneal (5).
Se alcanzan niveles semejantes de ofloxacino en humor acuoso administrando el fármaco vía oral o local en colirio, aunque en el humor vítreo las concentraciones son mayores si se administra por vía oral (6). Administrándolo en colirio se alcanzan niveles elevados en córnea y humor acuoso, superando la concentración mínima inhibitoria para los patógenos oculares clave (7-10).
Las LC hidrófilas de alto contenido en agua son las más usadas como lentes terapéuticas, aunque también se han utilizado escudos de colágeno (11) y actualmente las nuevas LC desechables son preferidas por su bajo coste (12).
En otros estudios (13) se ha investigado el comportamiento de las LC hidrofílicas Acuvue® para la administración de ofloxacino en pacientes que iban a ser intervenidos de catarata. Al comienzo de la intervención tomaban una muestra de humor acuoso para su análisis. Concluyeron que las LC Acuvue, embebidas en ofloxacino, podían liberar suficiente cantidad de fármaco y alcanzar concentraciones bacteriostáticas en humor acuoso. Sus autores mantenían las LC en inmersión durante una hora para cargarlas de colirio, mientras que en el presente trabajo se demuestra que 6 min. es tiempo suficiente.
Los resultados obtenidos muestran que las LC desechables diarias absorben 78 mg a los 6 min. de imbibición, lo que representa el 65% del total de 120 mg de una gota, la mitad de esta cantidad queda adherida a la superficie y la otra mitad penetra dentro de la LC. La LC cargada durante 6 min. con ofloxacino, a los 70 min. ha liberado 64 mg en SF; y, si se cambia el SF cada 5 min. habrá liberado el 100% del ofloxacino a los 35 min. Se admite que el mar lagrimal tiene un volumen de 10 ml (14), que la tasa de producción lagrimal oscila entre 0,5 y 2,2 ml/min.(15), lo que supone que en algunos individuos se habrá renovado la totalidad de la lágrima en 5 min. mientras que en otros se precisarán 20 min. Por otra parte, existen estudios afirmando que las soluciones acuosas instiladas en el mar lagrimal desaparecen un minuto después (16), por lo que la utilización de LC, que libera lentamente el medicamento, mantendrá más tiempo su efecto.
BIBLIOGRAFÍA