LARROSA JM, POLO V, IZAGUIRRE L, PINILLA I, PÉREZ S, GONZALVO F, HONRUBIA FM

El empleo de materiales de alto contenido en agua en la fabricación de las mallas lenticulares ha ampliado el abanico de indicaciones terapéuticas de las lentes de contacto (LC), permitiendo su uso como reservorio medicamentoso (1-3), bien como fin único o aprovechando sus otras cualidades, ópticas y de protección de la superficie corneal.

De entre los fármacos que pueden mejorar su biodisponibilidad en la superficie ocular, los antibióticos son uno de los grupos terapéuticos que mejor pueden aprovechar esta propiedad de las LC.

Los antibióticos de amplio espectro, como las fluoroquinolonas, tienen una gran difusión en el tratamiento de las infecciones oftalmológicas superficiales. Las fluoroquinolonas actúan interfiriendo en la síntesis del DNA bacteriano al inhibir la DNA girasa del microorganismo (4-6). El ciprofloxacino es una de las quinolonas más activas en términos de concentración inhibitoria mínima (CIM) frente a bacterias como Pseudomona aeruginosa y Staphylococcus aureus. Una de las presentaciones disponibles comercialmente para el uso tópico ocular es el hidrocloridrato de ciprofloxacino al 0,3% ó 3 mg/ml (Alcon Iberhis SA, Madrid). Esta concentración es altamente superior a la CIM de los patógenos oculares, exceptuando hongos y virus (6, 7) además de ser bien tolerado tópicamente y poseer una buena penetración a través de la córnea (6). Existen estudios que han demostrado la efectividad del ciprofloxacino frente a la mayoría de los gérmenes patógenos oculares responsables tanto de conjuntivitis como de queratitis bacterianas, incluso como único tratamiento, lo que lo convierte en una droga de gran interés práctico y de inevitable estudio (8-11).

El objetivo de este estudio es determinar la curva de biodisponibilidad de ciprofloxacino en lágrima según el porte o no de lente de contacto de alta hidrofilia.

Participaron en el estudio 24 voluntarios sanos a quienes se adaptó una LC en su ojo derecho. Se emplearon LC de 58% de contenido acuoso y 42% polímero (Etafilcon A), diámetro 14,2 y potencia -0,50 D (1-Day Acuvue, Vistakon, Johnson & Johnson, Jacksonville, Fl).

Tras la adaptación de la LC se esperaron 10 minutos para que el parpadeo y lagrimeo postadaptación no interfirieran en la dilución del antibiótico. Tras esta espera se instilaron 2 gotas de colirio de ciprofloxacino al 0,3% (Alcon Iberhis, Madrid) cada minuto durante 5 minutos, tanto en el ojo con la LC como en su adelfo.

Se obtuvieron muestras de lágrimas para el estudio de su actividad antibiótica. Las muestras fueron tomadas mediante tiras de Schirmer puestas en contacto con la película lagrimal. Las muestras fueron tomadas tras 10 minutos, 30 minutos, 1, 3 y 8 horas desde la última instilación de antibiótico.

En el grupo control las LC se retiraron tras los primeros 10 minutos tras la instilación (8 ojos). Ocho LC se retiraron tras 1 hora y otras ocho tras 6 horas de porte, para analizar la actividad antibiótica remanente en la malla lenticular.

La actividad antibiótica de las muestras se determinó mediante técnica de bioensayo.

Para ello, una vez humedecida la parte terminal de la tira de Schirmer se cortó la misma obteniéndose una muestra de papel humedecida en lágrima de 5 mm2 de superficie aproximadamente. La muestra se depositó sin manipulación alguna sobre la placa de bioensayo para estudiar la actividad antibiótica presente. Las LC una vez retiradas fueron sembradas en dicho medio de cultivo para evaluar la actividad antibiótica remanente.

Para la técnica de bioensayo se emplearon placas de cultivo convencional con medio de Muller-Hilton, empleando una variante del método descrito por Golden y Baum, ya empleada por nuestro grupo en estudios previos (2, 3, 12-14). Las placas fueron sembradas antes de la colocación de las diferentes muestras a estudio con la cepa de Escherichia coli ATCC 25922, que es sensible al ciprofloxacino. Tras depositar las muestras las placas se cultivaron a 37· C durante 24 horas procediéndose a la lectura de los halos de inhibición bacteriana alrededor de las muestras.

Estos halos de inhibición guardan una proporción con la cantidad de antibiótico presente. Para correlacionar los mm de inhibición con los microgramos de ciprofloxacino, se realizaron lecturas de los halos inducidos por cantidades conocidas de ciprofloxacino obtenidas a partir de diluciones progresivas del colirio original (18 diluciones desde 6x10-4 microgramos, 3x10-4, 1.5x10-4, y así progresivamente hasta 8.8x 10-9 y 4.4x 10-9 microgramos).

A partir de los pares de valores (mm. de inhibición, ,ugr. de ciprofloxacino) y con ayuda informática, se calculó la formula de una curva patrón que los relaciona, curva de tipo y=(a+bln(x)), en la que "x" son los microgramos de antibiótico e "y" los mm de inhibición, siendo "a" y "b" constantes.

De esta forma, a partir del valor en mm de inhibición de una muestra, podemos conocer la cantidad de microgramos que existe en dicha muestra.

En todos los ojos pudo detectarse actividad antibiótica durante la primera hora tras la instilación antibiótica. No obstante, los ojos que recibieron tratamiento tópico presentaron niveles de antibiótico muy bajos, cercanos al mínimo detectable con la técnica de bioensayo descrita. Sin embargo, los ojos con LC mantuvieron niveles de actividad antibiótica superiores durante las 3 primeras horas (Figura 1).

Figura 1. Niveles de ciprofloxacino presentes en las muestras de papel de Schirmer impregnadas en lágrima de voluntarios sanos en dependencia del porte de LC de 58% de hidrofilia tras la instilación de colirio de ciprofloxacino 0,3% (medición por técnica de bioensayo, E. coli ATCC25922).

La actividad antibiótica en el grupo sin LC a las 3 y 6 horas y en el grupo de LC a las 6 horas no pudo ser detectado mediante la técnica de bioensayo descrita, cuyo mínimo detectable es de 0.014 microgramos de Ciprofloxacino.

La actividad antibiótica de las LC retiradas obtuvo halos de inhibición antibiótica máximos a los 10 minutos, disminuyendo tras una hora de porte (actividad antibiótica equivalente a 37.7 microgramos de Ciprofloxacino) y cercano al mínimo detectable tras 6 horas de porte (5 LC no presentaron actividad y 3 mostraron una actividad equivalente a 0.018 microgramos).

Desde las primeras indicaciones de uso de LC como reservorio medicamentoso (1), las LC han representado una importante alternativa para aumentar la biodisponibilidad de diversos fármacos en la superficie ocular, e incluso para mejorar la penetración intraocular de los mismos (1,13,15).

El estudio de los niveles de antibiótico en lágrima presenta la dificultad de la escasa muestra disponible en cada medición. Para la monitorización de estos niveles se requiere una técnica que sea mínimamente invasiva y capaz de analizar pequeñas cantidades de muestra. Se ha empleado técnicas de bioensayo por ser permitir el análisis de actividad antibiótica de muestras de lágrima obtenidas a partir del "papel secante" que forma las tiras de Schirmer empleadas para el estudio de secreción lagrimal. El bioensayo ha sido empleado en otras determinaciones de niveles antibióticos oculares y en este trabajo es difícilmente sustituible por otros procedimientos (2,3,13,14).

Cuando un fármaco es instilado en la superficie ocular se disuelve en la lágrima e impregna o penetra los tejidos oculares, según sus características físico-químicas y el estado de barreras anatómicas como el epitelio corneal. Sin embargo, tras un período de tiempo es eliminado por el flujo sanguíneo o por los canalículos lagrimales.

En determinadas patologías, como en las queratitis microbianas, se necesitan niveles mantenidos de antibiótico en la superficie ocular. Para ello, debe aumentarse la frecuencia de instilación, emplear inyecciones subconjuntivales o recurrir a sistemas de reservorio medicamentoso como es el empleo de LC (16). Ésta última alternativa puede ser la menos invasiva y más sencilla, lo que facilitará el cumplimiento de las pautas de instilación. En la Figura 1 se muestra como el empleo de una LC puede mantener el nivel de antibiótico en la superficie ocular de manera prolongada, aunque tras períodos superiores a 3 horas el recambio del contenido acuoso de la lente disminuya la cantidad de antibiótico hasta niveles cercanos al mínimo detectable por la técnica de bioensayo empleada.

Las lentes de 58% de hidrofilia han demostrado contribuir efectivamente a la liberación sostenida de ciprofloxacino en la superficie lagrimal, aunque es posible que el empleo de LC de hidrofilia superior pueda prolongar la permanencia del antibiótico en lágrima.