Fig. 1. Curva patrón de correlación entre los mm. de diámetro del halo de inhibición de crecimiento bacteriano en relación con los microgramos de sparfloxacino presentes en la muestra estudiada.
CURVAS DE SATURACIÓN DE SPARFLOXACINO EN LENTES DE CONTACTO DE HIDRATACIÓN MEDIA
LARROSA JM, POLO V, PÉREZ S, PINILLA I, IZAGUIRRE L, HONRUBIA FM
SUMMARY
SPARFLOXACIN SATURATION CURVES IN MEDIUM WATER-CONTENT CONTACT LENSES
Purpose: To determine the sparfloxacin saturation curve in medium water-content disposable contact lenses.
Methods: The contact lenses (58% water content) were placed in sparfloxacin 0.3% for 10 seconds, 1, 2, 5, 10 and 30 minutes. The amount of antibiotic in the contact lenses was tested by means of bioassay.
Results: The increasing saturation of antibiotic reaches the 50% after 1 minute and almost the total amount after 10 minutes.
Conclusions: Sparfloxacin incorporates fast into medium water-content contact lenses.
KEY WORDS: Sparfloxacin, quinolones, contact lenses.
RESUMEN
Objetivo: Determinar la curva de saturación de sparfloxacino en lentes de contacto desechables de hidratación media.
Método: Hemos determinado mediante técnica de bioensayo la cantidad de antibiótico presente en lentes de contacto del 58% de hidrofilia después de distintos tiempos de imbibición en una solución de sparfloxacino al 0,3% (10 segundos, 1, 2, 5, 10 y 30 minutos).
Resultados: La saturación de antibiótico presenta un patrón ascendente, llegando a un 50% de saturación máxima tras un minuto de exposición, alcanzando prácticamente los niveles máximos tras 10 minutos de imbibición.
Conclusiones: El sparfloxacino se incorpora rápidamente a las lentes de contacto de hidrofilia media.
PALABRAS CLAVE: Sparfloxacino, quinolonas, lentes de contacto.
TITULO ABREVIADO: Saturación de lentes de contacto con sparfloxacino.
INTRODUCCIÓN
El uso de lentes de contacto (LC) terapéuticas como reservorio medicamentoso optimiza y mejora las pautas de tratamiento antibiótico en un gran número de patologías corneales. Gracias a ellas se puede potenciar la penetración intraestromal de antibiótico o permitir aumentar los intervalos de instilación de colirio, gracias a su capacidad de actuar como reservorio medicamentoso. Una LC del 38% de hidrofilia saturada de antibiótico puede obtener una penetración intraestromal al cabo de 6 horas equivalente a la lograda por la instilación de colirio horario (1). Para aumentar la disponibilidad de antibiótico en la película lagrimal es preferible utilizar LC de mayor porcentaje de hidratación, como son las LC desechables empleadas con fines ópticos. Su saturación de antibiótico es rápida, siendo más lenta en el caso de LC de hidrofilias menores. El uso de LC desechables de porte permanente en indicaciones seleccionadas puede permitir una mayor accesibilidad a esta forma de tratamiento. Este tipo de LC puede mejorar algunas pautas antibióticas tópicas, aumentando la disponibilidad de antibiótico o permitiendo espaciar las instilaciones del colirio.
En este trabajo pretendemos comparar los niveles de saturación antibiótica alcanzados por LC desechables de hidratación media. El antibiótico escogido es el sparfloxacino (SPX) que es un antibiótico de amplio espectro, como el resto de las quinolonas aunque con mayor actividad sobre el Streptococo.
OBJETIVO
Determinar la curva de saturación de LC desechables de hidratación del 58%, tras distintos tiempos de impregnación en sparfloxacino.
MATERIAL Y METODO
Se emplearon 12 LC desechables con un 58% de componente acuoso y 42% de polímero (etafilcón A), con una curva base de 9 mm. y un diámetro de 14,2 mm. La potencia de las lentes fue de -0,50 dioptrías, ya que van ha ser empleadas con finalidad terapéutica, en vez de óptica. Estas LC fueron facilitadas por Johnson & Johnson (1-day ACUVUE, Vistakon, Jacksonville, FL).
Todas las LC fueron introducidas en una solución de sparfloxacino a una concentración del 0,3% (Rhône-Poulenc, Rorer, París, Francia).
Se retiraron 2 LC de la solución de antibiótico tras 10 segundos y tras 1, 2, 5, 10 y 30 minutos de impregnación en el antibiótico. Las LC se colocaron en un contenedor con 1 ml. de agua estéril bidestilada. Tras 1 hora, tomamos 10 microlitros de cada uno de los frascos que contienen las LC, impregnando con esta cantidad unos discos de difusión estériles de 8 mm. de diámetro (discos-problema).
La actividad antibiótica de estos discos se determinó mediante una técnica de bioensayo ya descrita por otros autores (1-5). Se colocaron un total de 2 discos-problema de cada solución en placas de cultivo sembradas con Escherichia coli ATCC 25922, sensible a las quinolonas, proveniente de una solución en suero salino fisiológico de 106 UFC/ml. Para todos los bioensayos realizados se empleó la misma cepa y dilución de E. Coli. Se evaluó la cantidad de antibiótico mediante el método de difusión disco-placa, usando placas de cultivo microbiológico convencionales de Müller-Hinton en las que introducimos un disco estándar de 1 microgramo de SPX obtenido a partir de la solución original para establecer un punto de referencia común a todas las placas y detectar los posibles errores de inóculo.
Las placas se cultivaron 37° C. Los halos de inhibición de proliferación bacteriana fueron leídos a las 20 horas por dos observadores independientes.
Para correlacionar los mm. de inhibición con los microgramos de SPX se realizó simultáneamente una curva patrón de actividad del SPX. Para ello se obtuvieron con diluciones seriadas de la solución inicial obteniendo cantidades conocidas de 6, 3, 1,5, 1, 0,5, 0,25, 0,125, 0,1, 0,5 y 0,025 microgramos de SPX. Con estas cantidades se impregnaron discos de difusión estériles que se sometieron a la técnica de bioensayo descrita anteriormente (discos patrón). A las 20 horas cada placa fue valorada por los dos observadores. De este modo se obtiene la curva que correlaciona los milímetros de diámetro del halo de inhibición de crecimiento bacteriano con cantidades conocidas de SPX. De esta forma se obtiene una curva patrón de actividad del SPX que permite calcular la cantidad de SPX de los discos-problema (Figura 1).
Fig. 1. Curva patrón de correlación entre los
mm. de diámetro del halo de inhibición de crecimiento bacteriano en relación
con los microgramos de sparfloxacino presentes en la muestra estudiada.
RESULTADOS
La curva patrón empleada para la correlación entre mm de diámetro del halo de inhibición de crecimiento bacteriano y microgramos de SPX viene definida por la función:
mm = a + b In(µg)
siendo:
In= logaritmo neperiano.
a= 32,220782
b= 3.0481982
y con una r2 superior a 0,98.
Las LC se impregnaron de antibiótico de manera exponencial en relación con el tiempo de permanencia en la solución de antibiótico (Figura 2).
Fig. 2. Curva de saturación de lentes de
contacto de 50% de hidrofilia en sparfloxacino 0,3%. Nótese que son valores de
antibiótico por cada 10 microlitros de muestra. En 1 ml los valores serían 100
veces superiores.
DISCUSION
La técnica de bioensayo empleada ya ha sido utilizada por otros autores y por nuestro grupo de trabajo para el estudio de biodisponibilidad de antibiótico en LC de diferentes grados de hidratación. Es una técnica relativamente sencilla y de bajo coste (1-5).
El empleo de LC permite conseguir y mantener niveles elevados de antibiótico en la película lagrimal, y facilita la posología de la terapia antibacteriana tópica (6, 7).
Este trabajo pretende determinar la saturación de SPX lograda por LC del 58% de hidratación tras diferentes tiempos de impregnación en antibiótico lo que puede permitir establecer el tiempo efectivo que debemos emplear en nuestra consulta para saturar una de estas LC antes de su uso.
La curva de saturación obtenida presenta un incremento logarítmico de saturación de la LC, por lo que los minutos más efectivos en el proceso de saturación son los iniciales. El tiempo de permanencia en el colirio va a depender de la cantidad de antibiótico que deseemos. Por ejemplo, en un tiempo tan reducido como 10 minutos la LC va a presentar un gran contenido de SPX, ostensiblemente mayor que el que va incrementarse con otros 20 minutos de impregnación (30 minutos), aunque deba emplearse un tiempo lo más extenso posible.
Las LC desechables, empleadas como LC terapéuticas representan una alternativa terapéutica importante, debido a su bajo coste, posibilidad de fácil reemplazamiento en caso de pérdida o de continuación del tratamiento en aquellos casos en los que dudemos del cumplimiento de las instilaciones de colirio antibiótico por parte del paciente. En estos casos, las LC de porte diario pueden ser altamente beneficiosas.
BIBLIOGRAFIA